题目名称：产紫杉醇内生真菌HY1和HY2的观察和形态的初步鉴定

学生姓名

洪易来

专业

生物工程

学号

指导教师姓名

周修任

所学专业

生态学

职称

副教授

完成期限

20XX年10月01日至20XX年05月01日

一、选题的目的意义

紫杉醇是从短叶红豆杉（Taxus brevifclia）树皮中分离到的一种四环二帧化合物，堪称世界医药史上开发最成功的一种植物性抗癌药物，能有效地治疗晚期卵巢癌，乳腺癌和其他癌症，被称为是癌症的重大进展之一。

近年来地球人口和癌发率呈爆发性增长，对紫杉醇的需求量亦在逐年增加，目前紫杉醇的供应仍依赖于传统的红豆杉中提取。这种获得方式必然导致红豆杉的大量砍伐和濒临灭绝。

鉴定产紫杉醇菌种的类属用以比较各类属产紫杉醇菌株产紫杉醇量的高低做对比以找出产量最高的类属，进行筛选诱变培养出高产紫杉醇菌株用于生产做准备。

二、国内外研究现状

国内外学者已经致力于研究紫杉醇的生产，多方面寻找生产紫杉醇经济有效的原料。1993年，美国化学家Stierle和植物病理学家Strobel在蒙塔那西北部国家冰川公园的短叶红豆杉中分离到一株内生真菌，利用质谱、免疫化学、色谱和放射性化学标记等方法证实此种内生菌能产生紫杉醇，这一发现开创了利用微生物生产紫杉醇的新途径。Holton 和Nieolaou分别完成了紫杉醇的全合成，尽管这些方法是化学研究上的杰作，但是合成路线复杂，反应条件难以控制，试剂繁多，制备成本昂贵，只能停留在实验室阶段，不能进行工业化生产。目前研究生产紫杉醇的方法主要有四种：① 由红豆杉植物中提取；②化学半合成；③ 由红豆杉细胞培养物中提取；④ 由产紫杉醇的红豆杉内生真菌产生， 人们一直尝试利用其它的方法生产紫杉醇近年来的研究发现，从植物内真生菌中发酵生产紫杉醇被证明是解决药源的有效途径。

三、主要研究内容

1.分离纯化产紫杉醇内生真菌，进行插片培养和平板培养，观察菌落形态、颜色、生长速度，分泌产物的气味并进行拍照。产孢子后在对菌种进行光镜观察，观察孢子和菌丝形态并进行拍照。

2.根据所观察到的菌落形态、孢子和菌丝的结构形态，参照《真菌鉴定手册》对所观察菌种进行初步鉴定它们所属的分类地位。

四、毕业论文（设计）的研究方法或技术路线

本实验通过本普通PDA培养基对进行菌株的分离纯化并进行培养，培养一段时间至其长出孢子为止，通过插片培养的方法进行制片，再将所制的片在光镜下观察形态特征，结合《真菌鉴定手册》进行比对分析来初步鉴定所培养菌株的种类。

主要参考文献与资料

[1]   甘烦远，沈月毛，郝小江．紫杉醇生物合成的研究进展．生物工程进展，2000, 20（1）：52~56

[2]   周东坡,平文祥. 微生物发酵法生产抗癌药物紫杉醇[M] .北京:科学技术出版社,2003 ,1～234.

[3]   邱德有,黄美娟,方晓华,等. 一种云南红豆杉内生真菌的分离[J ] . 真菌学报,1994 ,13 (4) :314～316

[4]   Strobel G, Yang X S ,Sears J et al. Taxol from Pestalotiopsismicrospora , an endophytic fungus of Tax us wallachiana [J ] .

[5]   张理珉,陆和生,游洪云,等.一株产紫杉醇的内生真菌的分离及产物鉴定[J].云南大学学报(自然科学版),1998,20(5):385-387

[6]   王建峰,吕华鹰,黄耀坚,等. 一株新的紫杉醇产生菌及其抗肿瘤活性[J ] . 厦门大学学报(自然科学版) ,1999 ,38 (4) 6 ]

[7]   秦小琼,傅庭治,曹幼琴,等1 红栓菌胞外漆酶的诱导、纯化及部分性质研究[J ]1 微生物学报,1996 ,36(5) :360 – 3661

[8]   牛红星, 卢全伟, 王理顺, 等.河南太行山国家级猕猴自然保护区翼手类初步研究[J].河南师范大学学报, 2005, 33( 2) :90- 93

[9]   魏景超.真菌鉴定手册.上海科学技术出版社.1979

[10]  俞天骥. 紫杉醇———抗肿瘤新药. 国外医学药学分册,1993 ,20 :72

五、 指导教师审批意见

签名：

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